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鏈霉親和素(SA)修飾金納米顆粒150nm的技術

2025-08-13 [384]

以下是關于鏈霉親和素(SA)修飾150nm金納米顆粒的詳細說明,涵蓋制備、特性及應用:


1. 基本特性

  • 金納米顆粒(AuNPs)核心

    • 尺寸:150nm(可通過動態光散射DLS或透射電鏡TEM驗證)。

    • 表面等離子共振(SPR):在可見光區(約520-600nm)有強吸收,可用于比色檢測。

    • 穩定性:需表面修飾(如SA)防止聚集,SA提供負電荷增強膠體穩定性。

  • 鏈霉親和素(SA)修飾

    • 結合位點:每個SA可結合4個生物素分子,實現高密度生物分子偶聯。

    • 偶聯方式:通常通過靜電吸附或共價連接(如羧基-氨基交聯)將SA固定在AuNPs表面。


2. 制備方法

步驟示例

  1. AuNPs合成

    • 檸檬酸鈉還原法(適用于小尺寸):需調整方法(如種子生長法)制備150nm AuNPs。

    • 表征:UV-Vis光譜(SPR峰紅移)、TEM(確認單分散性)。

  2. SA修飾

    • 活化AuNPs:用帶羧基的 linker(如11-巰基十一烷酸,MUA)修飾AuNPs,EDC/NHS活化羧基。

    • SA偶聯:將SA與活化后的AuNPs孵育(pH 7.4 PBS緩沖液,室溫2小時)。

    • 封閉:加入BSA或乙醇胺封閉未結合位點。

  3. 純化

    • 離心(如10,000rpm, 15分鐘)去除游離SA,重懸于緩沖液(如含0.1% BSA的PBS)。


3. 關鍵質量控制

  • 結合效率

    • BCA法:測定上清液中未結合的SA濃度。

    • SDS-PAGE:驗證SA是否成功偶聯。

  • 功能性測試

    • 加入生物素化熒光分子(如FITC-生物素),通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測信號。


4. 應用方向

  • 免疫檢測

    • 側向層析:作為信號放大標簽,檢測生物素化抗體(如新冠病毒抗原檢測)。

    • ELISA替代:SA-AuNPs增強比色信號,提升靈敏度。

  • 分子診斷

    • DNA檢測:結合生物素化探針,用于核酸雜交(如SARS-CoV-2 RNA檢測)。

  • 細胞標記

    • 靶向標記細胞表面生物素化受體。

  • 藥物遞送

    • 裝載生物素化藥物,實現靶向釋放(需優化尺寸以穿透血管屏障)。


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