Diazo Biotin-PEG3-DBCO 是一種結合重氮基團、生物素、三聚乙二醇（PEG3）和二苯并環辛炔（DBCO）的多功能生物偶聯試劑，以下是對其的詳細介紹：

一、基本信息

• 英文名稱：Diazo Biotin-PEG3-DBCO

• 中文名稱：重氮生物素-三聚乙二醇-二苯并環辛炔

• 分子式：C52H60N8O9S

• 分子量：973.16

• 外觀：白色或淡黃色固體

結構式：

二、化學結構與功能

1. 重氮基團（Diazo）：

• 具有高反應活性，可以與多種生物分子發生反應，如與含氮基團（如胺基）反應，形成穩定的偶聯產物。

• 重氮基團還可通過光活化或加熱與碳氫鍵發生插入反應，常用于標記或偶聯靶分子。

2. 生物素（Biotin）：

• 具有與鏈霉親和素或抗生物素蛋白強力結合的能力，用于生物標記和分子捕獲。

3. 三聚乙二醇（PEG3）：

• 提供了柔性和間隔功能，有助于增加偶聯物的溶解度和穩定性。

• 減少非特異性結合和聚集，提高分子的生物相容性。

4. 二苯并環辛炔（DBCO）：

• 一種對疊氮基團（Azide）具有高度親和力的環辛炔衍生物，用于點擊化學反應（click chemistry）。

• DBCO可以與疊氮基團進行無銅點擊反應（copper-free click reaction），在溫和條件下高效生成穩定的三唑環結構。

三、應用領域

1. 生物標記：

• 可用于蛋白質、抗體、核酸等生物大分子的標記和偶聯。

• 通過重氮基與蛋白質中的酪氨酸殘基發生共價結合，將生物素和DBCO基團引入蛋白質，修飾后的蛋白質可以用于后續的生物正交反應。

2. 點擊化學反應：

• 由于含有DBCO基團，該試劑可以與含疊氮化物的分子進行無銅點擊化學反應，從而實現生物分子間的偶聯。

3. 細胞表面標記：

• 通過點擊化學反應，將生物素標記到細胞表面特定分子，用于流式細胞術或熒光顯微鏡觀察。

4. 藥物遞送系統：

• 作為連接器，將藥物分子與載體（如納米顆粒、脂質體）相連，提高藥物的靶向性和生物相容性。

5. 生物傳感器的開發：

• 利用其生物標記和點擊化學反應的特性，開發高靈敏度的生物傳感器，檢測金屬離子、有機分子或生物分子。

6. ADC合成：

• 是一種可降解（cleavable）的含3個單元PEG的ADC linker，可用于合成抗體偶聯活性分子（ADC）。

7. 蛋白質組學研究：

• 可用于蛋白質的富集、分離和鑒定等研究。

四、操作與儲存

1. 溶解性：

• 在有機溶劑如DMSO、DMF中良好溶解，PEG鏈提高了在水中的溶解性。

2. 儲存條件：

• -20℃避光保存，避免頻繁解凍，儲存時間為1年。

3. 操作注意事項：

• 重氮基反應：可通過光活化或加熱與碳氫鍵（如酪氨酸殘基）發生插入反應，需控制反應條件以確保特異性。

• 點擊反應：DBCO基團與疊氮基團快速特異性結合，生成穩定三唑環，需控制溫度、時間等條件以確保反應效率。

• 毒性：操作時需佩戴防護裝備（如手套、護目鏡），以防止試劑對皮膚和眼睛的刺激。

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