Desthiobiotin-PEG4-CONH-Maleimide 是一種結合了脫硫生物素（Desthiobiotin）、聚乙二醇（PEG4）和馬來酰亞胺（Maleimide）的化合物，其核心功能是通過化學偶聯實現生物分子的標記與純化。

1. 結構解析

• 脫硫生物素（Desthiobiotin）：
  是生物素的類似物，與鏈霉親和素（Streptavidin）或親和素（Avidin）結合時，親和力低于生物素（解離常數 $K_d\approx 10^{?11}\text{M}$，而生物素為 $10^{?15}\text{M}$）。這一特性使其可通過競爭性置換（如添加游離生物素）在溫和條件下從結合復合物中洗脫，避免蛋白質變性，適用于非變性純化場景。

• PEG4 linker：
  由4個乙二醇單元組成的聚乙二醇鏈，提供以下優勢：

• 增強水溶性：減少疏水相互作用，提高化合物在緩沖液中的溶解度。

• 降低空間位阻：靈活的鏈結構減少目標分子間的立體阻礙，提升偶聯效率。

• 穩定性提升：減少非特異性吸附，延長試劑在溶液中的穩定性。

• 馬來酰亞胺（Maleimide）：
  在中性pH（6.5-7.5）下特異性與巰基（-SH）反應，形成穩定的硫醚鍵。常用于標記蛋白質、抗體或核酸中的半胱氨酸殘基，實現靶向偶聯。

2. 核心功能

• 生物分子標記：
  通過馬來酰亞胺與目標分子（如抗體、酶）的巰基反應，將脫硫生物素標簽共價連接至分子表面。例如，標記抗體后，可通過鏈霉親和素磁珠進行親和純化。

• 溫和純化：
  標記后的分子可通過脫硫生物素與鏈霉親和素的低親和力特性，在游離生物素競爭下實現非變性洗脫，保留生物分子活性，適用于對變性敏感的蛋白質或酶。

• 多功能應用：

• 免疫分析：作為熒光標記或酶標記的中間體，用于免疫熒光、ELISA等檢測。

• 蛋白質組學：標記特定蛋白質后進行親和富集，結合質譜分析。

• ADC（抗體偶聯藥物）開發：作為連接子（Linker），將毒素或熒光探針偶聯至抗體，實現靶向遞送。

3. 特點

• 高效偶聯：馬來酰亞胺與巰基的反應快速且專一，確保標記的高效性。

• 溫和洗脫：脫硫生物素設計避免高溫，保護生物分子功能。

• 靈活性：PEG4 linker長度適中，平衡了水溶性與空間靈活性，適應多種應用場景。

• 生物相容性：所有組分均具有良好的生物相容性，適用于體內或體外實驗。

4. 典型應用場景

• 蛋白質純化：標記重組蛋白后，通過鏈霉親和素柱純化，再用生物素洗脫。

• 表面等離子共振（SPR）：標記配體分子，固定于傳感器芯片表面，研究分子間相互作用。

• 細胞成像：標記熒光探針，通過鏈霉親和素-生物素系統實現細胞內靶向成像。

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