UV-Tracer Biotin NHS Ester 是一種結合了生物素（Biotin）、N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS Ester）活性基團和紫外追蹤基團（UV-tracer）的化學探針，主要用于生物分子的標記與追蹤。

一、結構與化學性質

• 結構組成：UV-Tracer Biotin NHS Ester由生物素分子、NHS酯活性基團和紫外追蹤基團三部分組成。生物素部分可與鏈霉親和素或親和素特異性結合，實現信號放大；NHS酯活性基團可與含伯胺基的分子（如蛋白質、抗體等）發生共價結合，形成穩定的酰胺鍵；紫外追蹤基團則賦予其紫外吸收特性，便于在標記過程中進行追蹤與檢測。

• 分子式與分子量：其分子式為C52H76N6O17S，分子量為1089.25。

• 物理性質：該化合物通常為淡黃色或白色固體，密度預測值為1.30±0.1 g/cm3，pKa預測值為13.90±0.40。

• 溶解性：可溶于DMSO、DMF等有機溶劑，有助于在實驗中的溶解與稀釋。

結構式：

二、應用領域

• 蛋白質標記與追蹤：UV-Tracer Biotin NHS Ester可與蛋白質中的賴氨酸殘基或N端氨基發生反應，形成生物素化的蛋白質。這種標記方法不僅保留了蛋白質的生物活性，還通過生物素-鏈霉親和素系統實現了信號的放大，提高了檢測的靈敏度。同時，紫外追蹤基團的存在使得標記過程可被實時追蹤與檢測，便于實驗操作與結果分析。

• 免疫分析：在ELISA、Western Blot等免疫分析中，UV-Tracer Biotin NHS Ester標記的抗體或抗原可與鏈霉親和素或親和素包被的固相載體結合，形成穩定的復合物。通過紫外檢測或化學發光檢測，可實現對目標分子的定量或定性分析。

• 親和純化：利用生物素-鏈霉親和素系統的高親和力，UV-Tracer Biotin NHS Ester標記的分子可被親和柱特異性吸附，從而實現目標分子的純化與分離。

• 細胞成像與追蹤：在細胞成像實驗中，UV-Tracer Biotin NHS Ester標記的熒光探針或抗體可特異性地結合到目標細胞或細胞器上，通過熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡觀察細胞內的動態變化。紫外追蹤基團的存在則有助于在標記過程中實時追蹤探針的分布與定位。

三、使用注意事項

• 反應條件：標記反應通常在pH 8-9的緩沖液中進行，此時NHS酯活性基團具有較高的反應活性。同時，可加入少量有機溶劑（如DMSO）以促進化合物的溶解與反應。

• 反應時間與溫度：反應時間與溫度需根據具體實驗條件進行優化。一般來說，反應時間過長或溫度過高可能導致非特異性結合或蛋白質變性等問題。

• 儲存條件：UV-Tracer Biotin NHS Ester應儲存于-20℃以下，避免光照與潮濕環境，以保持其化學穩定性與活性。

• 安全性：在使用過程中需佩戴適當的防護裝備（如手套、護目鏡等），避免直接接觸皮膚與眼睛。同時，廢棄物需按照實驗室安全規范進行處理。

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