Streptavidin-SH|鏈霉親和素-巰基

鏈霉親和素-巰基（Streptavidin-Thiol）是一種經過化學修飾的鏈霉親和素，它在生物研究和診斷中具有廣泛的應用。以下是對鏈霉親和素-巰基的詳細解釋：

一、鏈霉親和素簡介

鏈霉親和素（Streptavidin，SA）是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質，具有與生物素（Biotin）高親和力的特性。這種高親和力的結合使得鏈霉親和素在生物分子的檢測、分離和純化等領域中得到了廣泛應用。

二、巰基修飾

巰基（–SH）是一種非常活躍的官能團，通過化學修飾將巰基引入鏈霉親和素分子上，可以使其與其他含有巰基或巰基反應性基團的分子發生特異性共價反應。這種修飾方法通常用于與目標分子的共價結合，從而擴展鏈霉親和素的應用范圍。

三、鏈霉親和素-巰基的制備

鏈霉親和素-巰基的制備通常包括以下幾個步驟：

材料準備：需要鏈霉親和素和巰基修飾試劑，如N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯（SPDP）等。

溶解與混合：在PBS緩沖液中溶解鏈霉親和素，并配制適當濃度。同時，將SPDP溶解在適量的DMSO中，制備高濃度的修飾試劑溶液。然后，將SPDP溶液緩慢加入鏈霉親和素溶液中，維持反應體系的pH值在7.5左右。

反應與純化：在室溫下反應1-2小時，使SPDP的NHS部分與鏈霉親和素上的氨基反應，形成二硫鍵。接著，向反應混合物中加入還原劑如DL-二硫蘇糖醇（DTT）或三(2-羧乙基)膦（TCEP），斷開二硫鍵，釋放出巰基。反應完成后，通過透析或凝膠過濾去除未反應的修飾試劑和還原劑，得到純化的鏈霉親和素-巰基。

四、鏈霉親和素-巰基的應用

表面修飾：鏈霉親和素-巰基可以用于修飾金納米顆粒、電極、微孔板等表面，通過巰基與金等表面形成穩定的共價鍵，從而擴展這些材料在生物檢測和傳感中的應用。

共價連接：鏈霉親和素-巰基可以與其他含有馬來酰亞胺或其他巰基反應性基團的分子進行共價連接，用于構建復雜的生物傳感器和診斷試劑。

生物素檢測：鏈霉親和素-巰基可以結合生物素標記的分子，如抗體、核酸、蛋白質等，廣泛應用于免疫分析、分子生物學實驗和細胞成像等領域。

五、鏈霉親和素-巰基的優勢

鏈霉親和素-巰基的優勢在于其高特異性、高親和力以及修飾后不影響鏈霉親和素的生物素結合能力。這些特性使得鏈霉親和素-巰基在生物化學、免疫學和納米技術等領域中具有廣泛的應用前景。

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