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cas:41994-02-9,Biotinyl Tyramide,生物素-酪氨的應用

2025-11-21 [148]

生物素-酪氨(Biotin-Tyramide,CAS號:41994-02-9)是一種結合生物素(Biotin)與酪氨酰胺(Tyramide)的復合物,在生物醫學研究和診斷領域具有重要應用。

一、化學結構與性質

  1. 生物素(Biotin)

    • 又稱維生素H或輔酶R,具有環狀結構(含咪唑酮環和戊酸側鏈),與鏈霉親和素(Streptavidin)或親和素(Avidin)的結合親和力較高(結合常數達101? M?1),是生物標記和信號放大的核心基團。

  2. 酪氨酰胺(Tyramide)

    • 酪氨酸的衍生物,含酚羥基,在過氧化氫(H?O?)和辣根過氧化物酶(HRP)催化下,可生成高度反應性的自由基,與鄰近蛋白質(如抗原附近的酪氨酸殘基)共價結合,實現信號放大。

  3. 復合物特性

    • 分子式:C??H??N?O?S,分子量約363.48。

    • 物理狀態:固體/粉末,溶于水及多數有機溶劑。

    • 穩定性:需低溫(-20℃)、干燥、避光保存,避免反復凍融。

結構式:

image.png

二、核心應用領域

  1. 免疫組織化學(IHC)與細胞成像

    • 信號放大:通過HRP催化酪氨酰胺生成自由基,標記抗原附近蛋白質,結合鏈霉親和素-生物素-酶復合物顯色,顯著提高低豐度抗原檢測靈敏度。

    • 高靈敏度可視化:與熒光標記的鏈霉親和素結合,實現細胞內特定蛋白質的高分辨率成像,為病理學研究提供工具。

  2. 原位雜交(ISH)

    • 增強基因序列信號強度,提高檢測準確性,適用于熒光或顯色檢測。

  3. 酶活性研究

    • 作為酪氨酸激酶底物,通過磷酸化反應檢測酶活性,研究催化機制。

  4. 藥物研發

    • 靶向給藥:生物素標記藥物與腫瘤細胞表面受體結合的親和素/鏈霉親和素偶聯,實現精準輸送,降低副作用。

    • PROTAC技術:作為連接子(Linker),構建蛋白降解靶向嵌合體,誘導目標蛋白降解。

三、作用機制

  1. 標記過程

    • 特異性抗體與組織抗原結合 → 加入HRP標記二抗 → 添加生物素-酪氨酰胺 → H?O?和HRP催化酪氨酰胺生成自由基 → 自由基與鄰近蛋白質共價結合 → 鏈霉親和素-生物素-酶復合物顯色。

  2. 信號放大原理

    • 每個HRP分子可催化多個生物素-酪氨酰胺分子沉積,形成局部高濃度標記,通過鏈霉親和素-生物素系統進一步放大信號,突破傳統酶擴增程序靈敏度限制。

四、使用注意事項

  1. 儲存條件

    • 短期保存:4℃;長期保存:-20℃以下,避光、干燥,避免反復凍融。

  2. 操作規范

    • 避免形成灰塵和氣溶膠,接觸前需獲得特別說明;在通風良好環境中使用。

  3. 安全提示

    • 僅供科研使用,不可用于人體實驗、藥物開發或商業用途。

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