Biotin-XX Tyramide Reagent 是一種用于酶介導的酪酰胺信號放大（TSA）的生物素衍生物，其核心特性、應用領域及操作注意事項如下：

一、核心特性

1. 化學結構

• 由酚基、酪酰胺核心和長鏈親水生物素（Biotin-XX）組成，分子式為 C??H??N?O?S，分子量 589.79。

• 長鏈結構（XX）提供柔性空間，使生物素遠離反應位點，降低空間位阻對鏈霉親和素結合的影響。

2. 物理性質

• 形態：淡黃色至淡棕色固體或粉末。

• 溶解性：易溶于有機溶劑（如DMSO、DMF）及部分水溶性緩沖液，溶解度≥59 mg/mL（DMSO）。

• 穩定性：干燥狀態下穩定，需低溫（-20℃）避光保存；水溶液或含過氧化氫體系中酚基易氧化，需新鮮配制或避光操作。

• pH適應性：常用緩沖液范圍為pH 7–9，生物實驗條件下穩定，不影響靶分子結構。

3. 反應活性

• 在過氧化物酶（如HRP）催化下，酚基氧化生成酚氧自由基，與靶分子（如蛋白質或核酸）上的酪氨酸殘基共價結合，實現局部高密度標記。

• 生物素基團可與鏈霉親和素-熒光素、鏈霉親和素-HRP等探針結合，實現多重信號放大和多模態檢測。

結構式：

二、應用領域

1. 免疫組化（IHC）

• 信號增強：通過HRP催化酪酰胺自由基生成，實現抗原位點的高密度標記，結合鏈霉親和素-熒光素或酶探針，顯著提高低豐度蛋白檢測的靈敏度和準確性。

• 低抗體濃度應用：在無需較高靈敏度的場景中，可降低抗體或探針濃度，減少非特異性結合和交叉反應。

2. 原位雜交（ISH）

• 基因表達分析：標記靶核酸分子，實現基因表達的定量和定位分析，尤其適用于熒光檢測中克服組織自發熒光背景干擾。

3. 蛋白質組學研究

• 高靈敏度標記：結合TSA技術，對低豐度蛋白質進行高靈敏度檢測，為蛋白質相互作用和表達譜分析提供工具。

4. 細胞表面蛋白標記

• 膜不可滲透性：長鏈親水結構使其無法進入細胞，僅標記細胞表面蛋白，避免胞內蛋白干擾，適用于細胞表面受體研究。

三、操作注意事項

1. 儲存條件

• 短期保存：4℃；長期保存：-20℃以下，避光、干燥，避免反復凍融。

2. 安全防護

• 操作時佩戴手套和防護眼鏡，避免長期吸入、皮膚接觸或攝入；在通風良好環境中使用。

3. 溶液配制

• 水溶液或含過氧化氫體系中酚基易氧化，需新鮮配制或避光操作，確保反應效率和標記特異性。

4. pH控制

• 使用pH 7–9的緩沖液，避免pH影響靶分子結構或試劑穩定性。

5. 多重標記兼容性

• 可與熒光標記試劑、酶標記試劑等聯合使用，實現多重標記和檢測，需根據實驗需求優化條件。

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